• 2022-06-14

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618年中大促抢先看 | 小鼠Treg细胞鉴定及Marker表达与功能

 

 

在识别抗原后,T细胞接收T细胞受体(TCR)信号,进而被激活并分化为效应性T细胞,从而诱导免疫反应。然而,在识别抗原后,一小部分CD4+T细胞不会诱导免疫反应,但会抑制其他T细胞的活动。这些细胞被称为调节性T细胞(Treg)。

 

Treg研究始于40多年前。早在1970年代,Gershon和Kondo就在去除胸腺的小鼠身上进行了实验,并首次提出抑制性T淋巴细胞的存在。到2000年代初,研究人员发现IL-2及其CD25受体对于开发和维持Treg池至关重要。与此同时,科学家们发现了这些细胞的主要转录因子FoxP3,它使Tregs发挥作用并与高CD25表达有关。因此Treg表型定义为CD4+CD25hiFoxP3+

 

CD25

有报道表明,在淋巴细胞减少的小鼠内,纯化的CD4+CD25+细胞的转移能抑制幼稚CD4细胞介导的自身免疫。而CD4+CD25+细胞的缺乏也是新生胸腺切除小鼠产生自身免疫的原因。尽管CD45RBlow也被确定为CD4 Tregs的标记,但只有表达CD25的CD45RBlow细胞具有抑制性。由Thornton/Shevach建立的模拟体内Tregs功能的体外模型系统极大地促进了CD25作为Tregs相关表面标志物的识别。CD25表达的上调与TNF刺激后Tregs的功能增强有关,这表明高水平的 CD25表达可能指示着小鼠Tregs抑制性更强。但有研究显示CD25-的CD4亚群也具备调节功能,这种CD25-FoxP3+Treg在肿瘤、肠炎和老年小鼠中表达增加。因此,即使在小鼠中,使用CD25作为功能Tregs的替代标记也会产生假阳性和假阴性。

 

FOXP3

Foxp3通常被认为是Tregs生物过程的主要调节因子,包括谱系定型和发育分化。目前认为Foxp3能抑制IL2转录,上调CD25和其他Treg标记的表达,并赋予CD4+T细胞抑制活性。Foxp3基因突变会损害Treg功能,并导致小鼠鳞屑病。另一方面,体外分离的Treg或转导Foxp3的T细胞的细胞转移可以抑制自体炎症T细胞的活性。综合来看,Foxp3的表达调控对于控制免疫反应至关重要。

 

CD127

小鼠Treg通常以低CD127(IL-7Ra)表达为特征。然而,小鼠Treg上CD127的表达水平会有所不同,这取决于它们的定位和激活状态。表达ICOS和CD103的Treg表达更高水平的CD127。小鼠Tregs在体外和体内激活过程中显着上调其CD127表达,并且骨髓和皮肤中的Tregs也表达高水平的CD127 。

 

许多分子或它们的组合已被证明能够识别小鼠中的功能性抑制Tregs,如表中所总结的。虽然这些分子在本质上是不同的,但它们共同为描述功能Tregs提供了有用的工具,并促进了我们对这一重要的CD4细胞亚群的生物学过程和抑制机制的理解。这些“Treg标记“中的大多数也是由激活的Treg表达的,然而,与其他分子结合后,它们仍然可以作为具有高度抑制活性的激活Treg的标记。

 

 

小鼠功能性 Treg 的标志物

 

 

CD25

有报道表明,在淋巴细胞减少的小鼠内,纯化的CD4+CD25+细胞的转移能抑制幼稚CD4细胞介导的自身免疫。而CD4+CD25+细胞的缺乏也是新生胸腺切除小鼠产生自身免疫的原因。尽管CD45RBlow也被确定为CD4 Tregs的标记,但只有表达CD25的CD45RBlow细胞具有抑制性。由Thornton/Shevach建立的模拟体内Tregs功能的体外模型系统极大地促进了CD25作为Tregs相关表面标志物的识别。CD25表达的上调与TNF刺激后Tregs的功能增强有关,这表明高水平的 CD25表达可能指示着小鼠Tregs抑制性更强。但有研究显示CD25-的CD4亚群也具备调节功能,这种CD25-FoxP3+Treg在肿瘤、肠炎和老年小鼠中表达增加。因此,即使在小鼠中,使用CD25作为功能Tregs的替代标记也会产生假阳性和假阴性。

 

FOXP3

Foxp3通常被认为是Tregs生物过程的主要调节因子,包括谱系定型和发育分化。目前认为Foxp3能抑制IL2转录,上调CD25和其他Treg标记的表达,并赋予CD4+T细胞抑制活性。Foxp3基因突变会损害Treg功能,并导致小鼠鳞屑病。另一方面,体外分离的Treg或转导Foxp3的T细胞的细胞转移可以抑制自体炎症T细胞的活性。综合来看,Foxp3的表达调控对于控制免疫反应至关重要。

 

CD127

小鼠Treg通常以低CD127(IL-7Ra)表达为特征。然而,小鼠Treg上CD127的表达水平会有所不同,这取决于它们的定位和激活状态。表达ICOS和CD103的Treg表达更高水平的CD127。小鼠Tregs在体外和体内激活过程中显着上调其CD127表达,并且骨髓和皮肤中的Tregs也表达高水平的CD127 。

 

许多分子或它们的组合已被证明能够识别小鼠中的功能性抑制Tregs,如表中所总结的。虽然这些分子在本质上是不同的,但它们共同为描述功能Tregs提供了有用的工具,并促进了我们对这一重要的CD4细胞亚群的生物学过程和抑制机制的理解。这些“Treg标记“中的大多数也是由激活的Treg表达的,然而,与其他分子结合后,它们仍然可以作为具有高度抑制活性的激活Treg的标记。

 

 

小鼠功能性 Treg 的标志物

标志

功能

Cd25+

小鼠中的CD4+CD25+T细胞通常是FoxP3+Tregs,它们是异质的并且包含高度抑制和最小抑制亚群。然而,CD25可以在活化的 Teffs和记忆T细胞上表达,并且CD25-T细胞可以是有效的抑制 FoxP3+Tregs

FoxP3+

主调节器和迄今为止最好的Treg细胞内标记物。FoxP3+Tregs在表型和功能上是异质的,包括高度抑制性和最小抑制性Tregs

CTLA4+

Tregs在细胞内组成性和优先表达。表达水平可能表明 Treg 的抑制效力

CD103+

具有产生IL-10潜力的记忆/效应Tregs。皮肤和黏膜归巢Treg的标志物

CCR6+

识别具有产生IL-10 潜力的效应记忆Treg

CD127-/low

与Teffs相比,小鼠Tregs表达的CD127 (IL-7Ra)水平相对较低。然而,ICOS+和CD103+Tregs表达高水平的CD127;在体外和体内激活后,其表达可在Tregs上上调

ICOS+

在正常小鼠的大多数Treg上表达。高表达可识别产生IL-10的Treg或Ag特异性Treg,它们具有Tr1/Th1/Th17细胞的特征

LAG-3+

在TCR激活的Treg上表达并有助于Treg功能。也在活化的Teffs上表达

CD39+

在大多数小鼠Treg上组成型表达.在体外TCR 刺激后适度上调,但显着增强Tregs对APT介导的DCs成熟的抑制活性。

TNFR2+

主要由30-40%的高度抑制性外周Tregs和约80%的胸腺Tregs表达。转导TNF对Tregs的激活作用,被Tregs作为抑制分子脱落

 

经过不断改进与优化,现推出小鼠Treg检测试剂盒,只需一个试剂盒,轻松解决购买搭配问题。与市面上的试剂盒相比,我们三个抗体均配备有同型对照,让实验分析更加简便清晰

 

试剂盒组分

CD4-FITC抗体+同型对照

CD25-APC抗体+同型对照

FOXP3-PE抗体+同型对照

Cell Staining Buffer

FOXP3/Transcription Factor

Fixation/Permeabilization Buffer Set

 

图例:小鼠脾脏用Treg试剂盒(Cat#FMT005KI)进行流式检测,四正柏的试剂盒细胞分群好,CD4?CD25?FOXP3?Treg比例与进口品牌试剂盒接近,染色效果相当。

 

相关产品列表

产品名称

产品货号

规格

Mouse Treg Flow Kit(FOXP3 PE/CD4 FITC/CD25 APC)

FMT005KI

25T

Human Treg Flow Kit(FOXP3 PE/CD4 FITC/CD25 APC)

FHT005KI

25T

Foxp3 / Transcription Factor Fixation/Permeabilization Buffer Set

FXP058S

100T

 

 

以上产品2022年6月18日-6月28日促销,欢迎订购!

 

 

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